Набор №25 экспресс-тест BIOCREDIT COVID-19 IgM/IgG Duo для определения антител

Для качественного определения наличия антител IgM или IgG к коронавирусу (SARS-CoV-2) в образцах сыворотки, плазмы (с добавлением натрия цитрата или этилендиаминтетрауксусной кислоты или гепарина) и цельной крови, подходит венозная кровь или кровь из пальца, взятая капиллярным способом у пациентов с клинической симптоматикой респираторного заболевания с подозрением на инфекцию COVID-19, а также у лиц, не имеющих признаков простудных заболеваний и не являющихся контактными с больными COVID-2019.

Взятие и хранение биологических образцов



1. Взятие образца цельной крови

(1) Взятие образца цельной крови из пальца
а) Используя ватный тампон, смоченный в спирте, протереть область пальца, из которой будет отбираться образец цельной крови;
б) Сжать кончик пальца и сделать прокол, используя стерильный скарификатор (ланцет);
в) Используя стерильный ватный тампон или марлю, удалить первую каплю крови;
г) Для взятия образца использовать микропипетку (не входит в комплект поставки Набора). Сохраняя сжатие, погрузить микропипетку в каплю крови на поверхности пальца, после чего с осторожностью прекратить сжатие для обеспечения свободного выхода крови из прокола (объем 20 µл). 

(2) Взятие образца цельной крови из вены
Для взятия образца цельной крови из вены использовать стандартную процедуру. Сбор крови выполнять в пробирку, в которой содержится пригодный антикоагулянт (например, натриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, гепарин натрия или натрия цитрат).

2. Взятие образца плазмы

Для взятия образца цельной крови из вены использовать стандартную процедуру. Сбор крови выполнять в пробирку, в которой содержится пригодный антикоагулянт (например, натриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, гепарин натрия или натрия цитрат). Полученный образец цельной крови далее центрифугировать для отделения плазмы.

3. Взятие образца сыворотки

Для взятия образца цельной крови из вены использовать стандартную процедуру. Сбор крови выполнять в пробирку, в которой НЕ СОДЕРЖИТСЯ антикоагулянт (например, натриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, гепарин натрия или натрия цитрат). Дать образцу цельной крови отстояться в течение 30 минут для свертывания, после чего центрифугировать для отделения надосадочного слоя.

Процедуры хранения образцов

Выполнять тестирование следует немедленно после взятия образца. Запрещается оставлять биологические образцы на долгое время в условиях комнатной температуры (1 ~ 40 °C). При отсутствии возможности немедленного выполнения анализа, допускается хранение образцов цельной крови в течение максимум 24 часов в холодильнике, при температуре в диапазоне 2 – 8 °C. Образцы сыворотки и плазмы крови могут храниться в течение 72 часов в холодильнике, при температуре в диапазоне 2 – 8 °C, или в течение более продолжительного времени в морозильнике при температуре не выше –20 °C.

1. Истекший срок годности теста
2. Нарушена упаковка изделия
3. Ненадлежащие условия хранения и транспортирования.
4. Другие противопоказания отсутствуют, за исключением случаев, когда забор материала не может быть осуществлен по медицинским показаниям.

Порядок выполнения тестирования

1. Перед выполнением тестирования, стабилизируйте температуру биологического образца и всех компонентов Набора на уровне комнатной.
2. Вскройте индивидуальный упаковочный конверт и извлеките из него тестовую кассету. Поместите кассету на сухую, ровную поверхность. 

Процедура тестирования на антитела COVID-19 класса IgG:

1. При помощи одноразовой капиллярной пипетки (входит в комплект поставки Набора), перенесите 10 µл образца сыворотки или плазмы или 20 µл образца цельной крови (при помощи микропипетки) в центр углубления для образцов на поверхности тестовой кассеты, маркированного литерой S.

2. Добавьте 3 капли разбавителя для образцов в центр углубления для буферного раствора на поверхности испытательной кассеты, маркированного литерой B (*) убедитесь в том, что для испытания используется адекватный объем разбавителя и достаточный объем биологического образца. Недостаточный или избыточный объем образца, равно как недостаточный или избыточный объем разбавителя могут привести к получению неточных (недостоверных или искаженных) результатов тестирования.

3. Считайте результат тестирования через 5 – 10 минут Внимание: не интерпретировать полученный результат через 10 минут после тестирования.

Процедура тестирования на антитела COVID-19 класса IgM:

1. При помощи одноразовой капиллярной пипетки (входит в комплект поставки Набора), перенесите 10 µл образца сыворотки или плазмы или 20 µл образца цельной крови (при помощи микропипетки) в центр углубления для образцов на поверхности тестовой кассеты, маркированного литерой S.

2. Добавьте 3 капли разбавителя для образцов в центр углубления для буферного раствора на поверхности испытательной кассеты, маркированного литерой B (*) убедитесь в том, что для испытания используется адекватный объем разбавителя и достаточный объем биологического образца. Недостаточный или избыточный объем образца, равно как недостаточный или избыточный объем разбавителя могут привести к получению неточных (недостоверных или искаженных) результатов тестирования.

3. Считайте результат тестирования через 5 – 10 минут Внимание: не интерпретировать полученный результат через 10 минут после тестирования.

Интерпретация результатов

Отрицательный результат тестирования

Если в окошке проявления результата окрашивается в красный цвет только контрольная линия (C): анализ дал отрицательный результат на наличие антител к коронавирусу.

Положительный результат тестирования

Если в окошке проявления результата окрашивается в красный цвет контрольная линия (C) и окрашивается в черный цвет линия тестирования антител класса IgG (T): анализ дал положительный результат на наличие антител класса IgG к коронавирусу;

Если в окошке проявления результата окрашивается в красный цвет контрольная линия (C) и окрашивается в черный цвет линия тестирования антител класса IgM (T): анализ дал положительный результат на наличие антител класса IgM к коронавирусу.

Недействительный результат тестирования

При отсутствии в окошке проявления результата окрашенной в красный цвет контрольной линии (C), результат тестирования является недействительным. Причиной такого результата может быть нарушение требований процедур взятия биологического образца, и/или процедур проведения анализа, или негодность используемой испытательной кассеты (тест-системы). В указанных обстоятельствах рекомендуется выполнить повторный анализ с использованием новой испытательной кассеты. Примечание: ширина полоски или интенсивность окрашивания не имеют значимости.

Назначение

Предназначен для качественного выявления антител IgM и IgG к коронавирусу COVID-19 в образцах цельной крови (венозной и капиллярной), сыворотки или плазмы.

Набор является вспомогательным инструментом для диагностики SARS-CoV-2. При тестировании биологических образцов с использованием Набора, полученные результаты, свидетельствующие о реактивности образца, должны быть подтверждены при помощи альтернативных методов анализа. Набор предназначен только для выполнения лабораторной диагностики в условиях in vitro. Медицинское изделие предназначено для применения только профессиональными работниками системы здравоохранения.

1. Чувствительность и специфичность

Испытания Набора реагентов для иммунохроматографического выявления антител IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2 в образцах цельной крови, сыворотки или плазмы (BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo) были проведены с использованием выборки биологических образцов, ранее протестированных при помощи оборудования, в котором применяется метод полимеразной цепной реакции
в режиме реального времени (ПЦР). В отношении каждого тестируемого образца были зафиксированы данные по времени взятия образца относительно времени возникновения симптомов заболевания. Полученные результаты представлены в Таблице 1.

Таблица 1. Данные аналитической чувствительности

Данные аналитической чувствительности	Результаты анализа с использованием Набора BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo
	IgM+	IgG+
> 3 дней после развития симптомов заболевания	85,7 % (12/14)	73,3 % (11/15)
> 5 дней после развития симптомов заболевания	90,0 % (9/10)	72,7 % (8/11)
> 7 дней после развития симптомов заболевания	100,0 % (6/6)	100,0 % (7/7)

Испытания Набора реагентов для иммунохроматографического выявления антител IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2 в образцах цельной крови, сыворотки или плазмы (BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo) были проведены с использованием выборки биологических образцов, ранее протестированных при помощи оборудования, в котором применяется метод твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). Полученные результаты представлены в Таблице 2/

Таблица 2.

Результаты анализа с использованием Набора BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo		Результат анализа методом ELISA		Данные аналитической чувствительности	Данные аналитической специфичности
		положительный	отрицательный
IgM	положительный	57	0	93,4 %	100,00 %
	отрицательный	4	22
ВСЕГО:		61	22
IgG	положительный	58	5	95,1 %	95,3 %
	отрицательный	3	102
ВСЕГО:		61	107

В ходе проведения клинико-лабораторных испытаний на территории РФ были получены следующие диагностические характеристики: диагностическая чувствительность Ig G 89,29 % (достоверность 95%, доверительный интервал (ДИ) 71,77-97,73%), Ig M 78,12 % (достоверность 95%, ДИ 60,03-90,72%) и диагностическая специфичность Ig G 98,04 % (достоверность 95%, ДИ 89,55-99,95%), Ig M 96,15 % (достоверность 95%, ДИ 86,79- 99,53%).

2. Воспроизводимость

Для проверки показателей точности и воспроизводимости в пределах одной серии и для разных экспериментальных серий, образцы трех разных серий изделий использовались для тестирования следующей выборки образцов: образцы с отрицательным результатом определения, образцы со слабо, умеренно и сильно выраженным положительным результатом определения. Все испытания выполнялись в трех повторностях. Во всех повторностях всех экспериментальных серий результат идентификации результатов составлял 100 %.

3. Перекрестная реактивность

Для проверки потенциала перекрестной реактивности, Набор реагентов для иммунохроматографического выявления антител IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2 в образцах цельной крови, сыворотки или плазмы (BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo) был испытан в отношении образцов, содержащих следующие антитела: антитела к возбудителю сифилиса, антитела класса IgG к вирусу гепатита A, антитела к вирусу гепатита B, антитела класса IgG к вирусу иммунодефицита человека, антитела класса IgM к вирусу иммунодефицита человека, и антитела к вирусу гепатита C. В отношении всех тестируемых антител у Набора реагентов для иммунохроматографического выявления антител к вирусу SARS-CoV-2 в образцах цельной крови, сыворотки или плазмы (BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo) не был обнаружен потенциал перекрестной реактивности.

4. Интерференция

Для проверки интерференции, Набор реагентов для иммунохроматографического выявления антител IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2 в образцах цельной крови, сыворотки или плазмы (BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo) был испытан в отношении образцов, содержащих 14 эндогенных и экзогенных веществ с установленным потенциалом взаимодействия.

Полученные результаты испытаний показали отсутствие взаимодействия Набор реагентов для иммунохроматографического выявления антител IgM/IgG к вирусу SARSCoV-2 в образцах цельной крови, сыворотки или плазмы (BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo) с анализируемыми веществами эндогенной и экзогенной природы.

5. Стабильность

Результаты исследований стабильности Набора реагентов для иммунохроматографического выявления антител IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2 в образцах цельной крови, сыворотки или плазмы (BIOCREDIT COVID-19 IgG+IgM Duo) методом «ускоренного старения» при температуре 50 °C показали, что Наборы стабильны в течение 129дней. Таким образом, ожидается что Набор будет стабилен в течение 24 месяцев при хранении в закрытом виде в исходном состоянии при температуре 1-40 ° C.

Испытание стабильности Набора в реальном времени подтвердило, что характеристики продукта были стабильными в течение 3 месяцев при температуре хранения 4 ± 3 ℃ / 40 ± 3 ℃ в закрытом виде во вторичной упаковке. Также тест будет проводиться дальше до 27 месяцев.

Результаты исследований стабильности образцов в охлажденном состоянии показали, что образец цельной крови можно хранить при температуре 2 ~ 8 ℃ в течение 24 часов. Образцы сыворотки и плазмы можно хранить при температуре 2 ~ 8 ℃ в течение 96 часов (4 дня).

Набор используется, как вспомогательное средство в диагностике. Результаты тестирования на антитела не должны использоваться в качестве единственного основания для подтверждения или исключения инфицирования SARS-CoV-2 или для информирования о статусе инфекции.

1. Набор предназначен только для диагностики в лабораторных условиях in vitro.
2. Воздействие влаги или теплового излучения может снижать стабильность реагентов. С учетом данного обстоятельства, медицинское изделие необходимо использовать как можно быстрее после вскрытия упаковочного конверта из фольги, не подвергая тестсистему воздействию внешней среды в течение продолжительного времени.
3. Не использовать Набор при наличии повреждений элементов упаковки (конверта для упаковывания индивидуальной испытательной кассеты или мембраны из алюминиевой фольги для герметизации флакона с разбавителем).
4. После завершения тестирования, необходимо надлежащим образом утилизировать все пробы и материалы. При обращении и утилизации любых биологических материалов, которые потенциально могут быть инфицирующими, необходимо строго соблюдать все требования, установленные в стандартах, руководствах и процедурах по обеспечению биологической безопасности. Для утилизации необходимо использовать специальные контейнеры для биологических отходов.
5. При обращении с тестируемыми образцами необходимо использовать защитные перчатки, защитную верхнюю одежду и защитные очки. После тестирования следует тщательно вымыть руки.
6. Выполнение повторных циклов замораживания и размораживания биологических образцов может привести к получению ложноположительных или ложноотрицательных результатов.
7. Перед утилизацией твердых отходов необходимо выполнить их обеззараживание при помощи обработки в автоклаве в течение 1 часа при температуре 121 °C.
8. Раствор для разведения биологического образца содержит натрия азид в количестве менее 0,1 %. При попадании разбавителя на кожу или в глаза, пострадавшему следует промыть пораженные участки кожи или глаза большим количеством проточной воды и обратиться за квалифицированной медицинской помощью, при необходимости.
9. Не использовать медицинское изделие после истечения срока годности.
10. Медицинское изделие не предназначено для повторного применения.
11. При тестировании запрещается использовать компоненты Набора из разных серий.
12. Запрещается использовать для тестирования биологические образцы, которые подвергались процедурам гемолиза, или образцы с признаками контаминации микроорганизмами, т.к. при анализе таких образцов возможно получение ошибочных результатов тестирования.
13. При получении спорных (сомнительных) результатов, рекомендуется выполнение анализа с использованием альтернативных методов, доступных в данных клинических условиях. Также как в обстоятельствах применения любых других методов и систем для тестирования, результаты испытаний такого типа не должны использоваться в качестве единственного основания для постановки диагноза. Окончательное решение 10 должно приниматься врачом (клиническим специалистом) после рассмотрения результатов всех лабораторных тестов и анализов, с учетом оценки общей клинической картины.